中文名称:人食管癌细胞KYSE150荧光素酶标记BALB/cA-nu小鼠模型(
英文名称:KYSE150-LUC
类型:食管癌动物模型
分级:NA
用途:用于食管癌研究。
研制单位:中国医学科学院医学实验动物研究所
保存单位:中国医学科学院医学实验动物研究所
食管癌是发生在食管上皮组织的恶性肿瘤,占所有恶性肿瘤的2%。全世界每年约有20万人死于食管癌。
食管癌系指由食管鳞状上皮或腺上皮的异常增生所形成的恶性病变。其发展一般经过上皮不典型增生、原位癌、浸润癌等阶段。食管鳞状上皮不典型增生是食管癌的重要癌前病变。患者有食管内异物感,或自食物通过时缓慢或有梗噎感。也可表现为吞咽时胸骨后烧灼、针刺样或牵拉样痛。进展期食管癌则常因咽下困难就诊,吞咽困难呈进行性发展,甚至完全不能进食。常伴有呕吐、上腹痛、体重减轻等症状。病变晚期因长期摄食不足可伴有明显的营养不良、消瘦、恶病质,并可出现癌转移、压迫等并发症。
BALB/cA-nu小鼠,胸腺缺失,为第11对染色体隐性遗传,T细胞免疫缺陷,B细胞正常,具有较高的NK细胞活力,无接触敏感性,无移植排斥反应。
人食管癌细胞KYSE150是一种低分化的鳞癌细胞,呈上皮样。将LUC基因稳定整合到LUC染色体上,获得单克隆细胞株,具有很强的发光能力,传代数次后仍能稳定高水平表达LUC。细胞形态和未转染细胞无明显区别。
图1 荧光素酶标记的KYSE150细胞系的阳性克隆检测
模型制作采用BALB/cA-nu裸小鼠,鼠龄6周,体重16—20 g。 BALB/cA-nu裸小鼠在实验室无特定病原体饲养间饲养。收集处于生长对数期的DsRed标记的KYSE150-LUC细胞肿瘤细胞,稀释至5×106cells/mL。取200μL细胞悬液进行尾静脉注射接种。
在接种的7、14、21、28天观察肿瘤的生长情况。在接种的第7天就可以观察到肿瘤荧光,出现肺部转移灶,通过肿瘤组织发出的荧光的光子数确定肿瘤的大小,随着观察天数的增加,肿瘤的体积和发光强度增加,且具有很好的相关性(图1)。
图1 人食管癌KYSE150-LUC尾静脉接种肿瘤模型
该小动物模型饲养在清洁级动物中,微生物处于监控状态,动物房有相应的保护措施,小鼠不会出现逃逸,不会对外界环境造成影响。