引言

随着畜牧业的快速发展，饲用微生物制剂因其在促进动物生长、改善肠道健康及增强免疫力等方面的显著作用，逐渐成为饲料添加剂的研究热点。产朊假丝酵母（Candida utilis）作为一种常见的饲用益生菌，能够利用廉价原料（如糖蜜、秸秆等）生产单细胞蛋白，并富含B族维生素和必需氨基酸，在动物营养中具有重要价值。然而，其活菌含量及纯度直接影响制剂效果，因此建立准确、的测定方法至关重要。本文系统介绍产朊假丝酵母的检测范围、项目、方法及仪器，为行业提供技术参考。

一、检测范围

产朊假丝酵母的测定主要适用于以下场景：

• 饲用微生物制剂生产：监控发酵过程中菌体浓度及活性；
• 产品质量控制：确保成品中活菌数、纯度及功能性指标达标；
• 科研与开发：评估菌种遗传稳定性或优化培养条件；
• 市场监管：验证产品标签标识的符合性。

二、检测项目

针对产朊假丝酵母的核心检测项目包括：

• 活菌计数：反映制剂的有效性；
• 纯度鉴定：排除杂菌污染；
• 形态学特征：镜检观察细胞形态与大小；
• 生化特性：如碳源利用能力、产酶活性等；
• 分子生物学鉴定：通过基因序列确认菌种真实性。

三、检测方法

1. 活菌计数法

采用平板稀释涂布法或倾注法，步骤如下：

• 将样品梯度稀释至10^-6~10^-8；
• 接种于YPD（酵母浸出粉胨葡萄糖）琼脂培养基；
• 28°C培养48~72小时后计数典型菌落（乳白色、光滑凸起）。

2. 纯度鉴定

结合选择性培养基与镜检：

• 使用含氯霉素的YPD培养基抑制细菌生长；
• 革兰氏染色后镜检，产朊假丝酵母呈革兰阳性、卵圆形；
• 通过ITS区PCR扩增与测序比对确认菌种。

3. 生化特性分析

参考《伯杰氏手册》进行以下试验：

• 碳源同化试验：检测对葡萄糖、木糖等利用能力；
• 尿素酶试验：产朊假丝酵母通常呈阴性。

四、检测仪器与设备

关键仪器清单及其功能说明：

• 生物安全柜：保障无菌操作环境；
• 恒温培养箱：维持28°C±1°C培养条件；
• 菌落计数器：自动化统计平板菌落数；
• PCR仪及电泳系统：用于分子生物学鉴定；
• 显微镜（带摄像系统）：观察细胞形态并记录。

五、质量控制要点

为确保检测准确性，需注意：

• 定期验证培养基灭菌效果及选择性；
• 设置阳性对照（标准产朊假丝酵母菌株）；
• 实验重复3次以上，计算相对标准偏差（RSD）≤10%；
• 规范样品保存条件（4°C短期，-80°C长期）。

结论

产朊假丝酵母的测定是保障饲用微生物制剂质量的核心环节。通过活菌计数、纯度鉴定及分子生物学技术的综合应用，可全面评估菌剂效能与安全性。未来，随着快速检测技术（如流式细胞术、荧光定量PCR）的普及，检测效率将进一步提升，为畜牧业绿色健康发展提供更有力支持。建议相关企业严格遵循国家标准（如GB/T 22547-2008），并持续优化检测流程。

了解中析

实验室仪器

合作客户